本研究的主要作者包括Laura Bellec、Maxime R. Hervé、Anne-Sophie Mercier、Pierre-Arthur Lenal、Sébastien Faure和Anne-Marie Cortesero。研究由法国多个机构合作完成,包括IGEPP-UMR 1349(INRAE, Institut Agro, Univ Rennes 1)和Innolea公司。该研究于2022年10月30日发表在《Pest Management Science》期刊上,并于2022年11月11日在Wiley Online Library上线。
本研究的主要科学领域是植物抗虫育种,特别是针对花粉甲虫(Brassicogethes aeneus)的抗性研究。花粉甲虫是欧洲油菜(Brassica napus)的主要害虫之一,目前尚无抗性品种可供使用。然而,白芥(Sinapis alba)作为一种近缘物种,已被证明具有一定的抗性潜力。因此,研究旨在开发一种中通量(mid-throughput)表型分析协议,以量化植物对花粉甲虫的抗性,从而为遗传图谱绘制和QTL(数量性状位点)定位提供数据支持。
研究分为以下几个步骤:
研究首先通过田间筛选选择了50个白芥基因型,并从中筛选出具有显著抗性差异的基因型。随后,在实验室条件下对这些基因型进行了抗性评估。研究还使用了油菜(Brassica napus)的一个中等易感基因型作为对照。
花粉甲虫从法国布列塔尼地区的冬季油菜田中采集,并在实验室条件下饲养。实验前,昆虫被饥饿48小时以确保其取食行为的一致性。
研究采用了三种不同的表型分析方法: 1. 传统盆栽植物实验:将四只花粉甲虫放置在植物的主花序上,并用塑料容器隔离。24小时后,记录受损花蕾的比例。 2. 离体花蕾实验:将一只花粉甲虫与离体花蕾一起放置在培养皿中,24小时后记录花蕾是否受损。 3. 微型植物实验:将植物种植在微型容器中,四只花粉甲虫被放置在植物的主花序上,48小时后记录受损花蕾的比例。
所有数据使用R软件进行分析,采用广义线性模型(GLM)和估计边际均值(emmeans)进行统计比较。研究还通过皮尔逊相关性检验评估了不同表型分析方法之间的一致性。
研究结果显示: - 在传统盆栽植物实验中,不同基因型之间的花蕾受损比例存在显著差异,油菜对照组的受损比例最高,白芥基因型的受损比例依次降低。 - 微型植物实验的结果与传统盆栽植物实验高度一致,表明微型植物实验可以替代传统方法进行中通量表型分析。 - 离体花蕾实验的结果与传统方法不一致,表明离体花蕾实验不适合用于抗性评估。
研究还验证了微型植物实验在大规模植物群体中的适用性,发现白芥基因型之间的抗性存在显著差异,证明了该方法的有效性。
本研究开发了一种中通量表型分析协议,能够有效量化植物对花粉甲虫的抗性。该方法通过微型植物实验显著提高了表型分析的效率,为大规模植物群体的抗性评估提供了可行方案。研究结果为油菜抗性育种提供了新的工具,并为未来通过遗传图谱绘制和QTL定位进一步挖掘抗性基因奠定了基础。
研究还讨论了未来改进该表型分析协议的可能性,例如通过自动化技术减少人工操作的时间和劳动强度。此外,研究强调了在控制条件下获得的实验结果需要在田间进行多次验证,以确保其在实际应用中的可靠性。
总之,本研究为植物抗虫育种领域提供了重要的技术突破,具有显著的科研和应用价值。