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本研究由Anastasia Anceschi、Alessia Patrucco、Parag Bhavsar、Marina Zoccola、Mirko Tessari、Luca Erbazzi和Paolo Zamboni共同完成,研究机构包括意大利国家研究委员会智能工业技术与系统研究所(CNR-STIIMA)和费拉拉大学血管疾病中心。研究发表于2023年8月的《ACS Omega》期刊上,卷号为8,页码范围30118-30128。
慢性伤口疾病在全球范围内影响大量人口,尤其是糖尿病患者和血管疾病患者。慢性伤口的愈合过程受到高铁水平和蛋白酶活性的抑制,铁通过氧化应激(ROS生成)和金属蛋白酶(MMPs)的作用阻碍伤口愈合。因此,开发一种能够结合铁并促进伤口愈合的生物活性敷料具有重要意义。本研究旨在通过羊毛衍生的角蛋白(keratose)制备一种自交联伤口敷料,用于慢性伤口中的铁螯合,从而促进伤口愈合。
研究流程包括以下几个主要步骤:
角蛋白提取
从羊毛中提取角蛋白,采用氧化法将羊毛中的半胱氨酸氧化为磺基丙氨酸,使其具有水溶性。提取后的角蛋白通过透析和冷冻干燥进行纯化,提取率为31%(w/w)。
角蛋白薄膜制备
将提取的角蛋白溶解于水中,通过浇铸法(casting)制备薄膜(ker-film)。为了增加薄膜的稳定性,对其进行热交联处理,使其不溶于水(c-ker-film)。
薄膜表征
通过傅里叶变换红外光谱(FTIR)、差示扫描量热法(DSC)和热重分析(TGA)对薄膜的结构和性能进行表征。FTIR分析显示交联反应主要通过蛋白质链的酸性和碱性基团进行。DSC和TGA分析表明,交联反应在170°C下进行30分钟即可完成。
铁吸附实验
通过电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)测试c-ker-film对Fe³⁺的吸附能力。实验结果表明,c-ker-film在1小时内可吸附74%的铁,1周后可吸附85%的铁。吸附动力学符合伪二级动力学模型和颗粒内扩散模型。
计算机模拟(QSAR)
使用OECD QSAR工具箱对c-ker-film的化学行为进行计算机模拟预测,结果表明角蛋白材料在人体应用中具有安全性。
商业敷料对比
将c-ker-film与市场上常用的慢性伤口敷料(如薄膜、纱布、水凝胶等)进行对比,强调其在生物相容性、生物降解性和铁螯合能力方面的优势。
角蛋白薄膜的制备与表征
热交联处理后的c-ker-film具有高水稳定性,1周后仅损失6%的重量。FTIR分析显示交联反应主要通过酯键和酰胺键进行,TGA分析表明交联薄膜的热稳定性略有下降。
铁吸附能力
c-ker-film在慢性伤口环境(pH 7.6)中表现出优异的铁吸附能力,1周后可吸附85%的铁。吸附动力学研究表明,铁吸附过程符合伪二级动力学模型,颗粒内扩散是速率控制步骤。
计算机模拟结果
QSAR模拟结果表明,角蛋白材料在人体应用中具有低致敏性,支持其作为生物活性敷料的潜在应用。
与商业敷料的对比
c-ker-film在生物相容性、铁螯合能力和成本效益方面优于传统敷料,特别是在减少氧化应激和促进伤口愈合方面具有显著优势。
本研究成功开发了一种基于羊毛角蛋白的自交联伤口敷料,能够有效结合慢性伤口中的铁,减少氧化应激,促进伤口愈合。c-ker-film具有高水稳定性、优异的铁吸附能力和良好的生物相容性,为慢性伤口治疗提供了一种新型生物材料。未来的研究应进一步开展体外和体内实验,验证其临床应用潜力。
创新性材料
首次将羊毛角蛋白用于慢性伤口敷料的开发,通过热交联处理使其具有高水稳定性和铁吸附能力。
高效铁螯合
c-ker-film在慢性伤口环境中表现出优异的铁吸附能力,1周后可吸附85%的铁,显著减少氧化应激。
计算机模拟支持
通过QSAR工具箱对c-ker-film的化学行为进行计算机模拟,验证其安全性和低致敏性。
与商业敷料的对比优势
c-ker-film在生物相容性、铁螯合能力和成本效益方面优于传统敷料,为慢性伤口治疗提供了新的解决方案。
本研究还详细探讨了角蛋白材料的生物相容性和生物降解性,强调了其在生物医学领域的广泛应用潜力。此外,研究还提供了角蛋白提取和薄膜制备的详细实验方法,为相关研究提供了参考。
本研究为慢性伤口治疗提供了一种新型生物活性敷料,具有重要的科学价值和应用前景。