该研究由李晨阳(Chenyang Li)、张欣欣(Xinxin Zhang)、杨晓磊(Xiaolei Yang)、张瑞琪(Ruiqi Zhang)、田长艳(Changyan Tian)和宋杰(Jie Song)等人共同完成,研究成果发表于《Marine Pollution Bulletin》期刊,文章编号为206(2024),发表于2024年7月24日。研究主要探讨了非均匀盐分分布对盐生植物 Suaeda salsa 生长与离子分布的影响。通过实验,作者们分析了这种盐分条件下植物的生长机制,特别是在根系非均匀盐分分布的情况下植物如何调整其离子吸收与水分利用,从而减轻盐胁迫。
盐生植物(halophytes)是能够在盐碱环境中完成生命周期的植物,它们能够通过多种机制应对高盐环境中的胁迫。因此,研究这些植物如何在盐碱土壤中生长,对农业盐碱地的利用与生态恢复具有重要意义。当前的研究表明,在自然环境中植物根系周围的盐分分布具有较大的空间异质性,然而关于盐生植物如何应对这种非均匀盐分分布的研究仍然不足。通过对Suaeda salsa(盐地碱蓬)进行非均匀盐处理,研究者们希望揭示其盐胁迫应对机制。
该研究主要通过对Suaeda salsa 进行根系分割实验来模拟不同盐分条件下的非均匀盐分分布,实验流程可以分为以下几个步骤:
植物材料与培养条件:研究使用了来自中国黄河三角洲地区的Suaeda salsa种子,这些种子在培养前存储于4℃的冰箱中。实验中,植物种子在温室条件下进行水培,使用的营养液含有1mm的硝酸盐(NO3^-),并调整pH为6.1 ± 0.1。在生长条件上,温度设定为28℃/21℃(白天/夜晚),光照周期为16小时白光与8小时黑暗。
实验设计与处理方式:实验设定了四个处理组,分别是均匀低盐(50/50mm NaCl)、均匀最佳盐浓度(200/200mm NaCl)、均匀高盐(350/350mm NaCl)和非均匀盐(50/350mm NaCl)。在非均匀盐处理组中,低盐侧根和高盐侧根分别接受不同浓度的NaCl处理。每个处理组的样本为6株植物,分别进行了根系形态学、干重、光合作用速率、离子浓度、ABA(脱落酸)浓度、Na+外流等的测定。
根系形态学分析:使用WinRhizo根系分析仪对根系进行扫描,测定总根长、根表面积和根尖数量,以此评估根系生长情况。
干重测定:通过在80℃下将根和茎叶干燥3天,测定植物的干重,进而评估植物的生长状况。
光合作用测定:使用便携式光合作用仪(CIRAS-3)测量植物的光合速率(PN),以了解盐分对植物光合作用的影响。
离子浓度测定:测定根与叶片中的Na+、K+、Cl-浓度,使用火焰光度计和离子色谱法进行分析,评估不同盐分条件下离子分布的变化。
ABA浓度与Na+外流测定:使用ELISA试剂盒测定根部ABA浓度,同时通过非侵入性微测技术(NMT系统)测量Na+的外流速率。
基因表达分析:通过RNA提取和RT-qPCR技术,测定与盐胁迫相关的基因(如SSSOS1、SSPIP、SSNRT1.1、SSNRT2.1等)的表达水平,以了解植物对非均匀盐处理的基因反应。
数据分析:所有实验数据均通过SPSS统计软件进行单因素方差分析,并采用Duncan多重范围检验来比较不同处理组间的差异,P值设定为≤0.05。
研究结果显示,非均匀盐处理显著改善了S. salsa的生长表现,尤其是在低盐侧的根系生长。具体表现为:
生长表现:非均匀盐处理组的S. salsa的茎叶干重、低盐侧根干重均显著高于均匀低盐、均匀最佳盐和均匀高盐处理组。尤其是低盐侧根的干重比均匀低盐组高出41%,比均匀高盐组高33%。
根系形态:低盐侧根的总根长、根表面积和根尖数均显著高于其他处理组。特别是与均匀最佳盐处理相比,低盐侧根的总根长增加了29%,根表面积增加了25%,根尖数增加了20%。
离子浓度:非均匀盐处理使低盐侧根中的Na+和Cl-浓度分别比均匀低盐处理高29%和30%。然而,这些离子浓度低于其他高盐处理组。与均匀高盐处理相比,非均匀盐处理使叶片中的Na+和Cl-浓度分别下降了8.4%和8.6%。此外,低盐侧根中的K+浓度较高盐组和均匀低盐组有所增加。
ABA浓度与Na+外流:非均匀盐处理促进了低盐侧根部ABA浓度的上升,ABA浓度比均匀低盐组高出11%。低盐侧根部Na+外流速率显著提高,比均匀低盐组高出两倍。
基因表达:与均匀低盐处理组相比,非均匀盐处理组中低盐侧根部的SSSOS1、SSPIP1-4、SSPIP2-1、SSNRT1.1和SSNRT2.1的表达水平均显著上调。特别是SSNRT1.1和SSNRT2.1的表达增加有助于低盐侧根吸收更多的水分和NO3^-,提高植物的盐胁迫耐受性。
研究表明,非均匀盐分处理显著改善了S. salsa的生长,并通过调节根系的离子分布和水分吸收缓解了盐胁迫。低盐侧根通过提高Na+外流、增加水分和NO3^-的吸收,减轻了高盐侧根部的盐胁迫。同时,ABA信号通路可能在此过程中发挥了重要作用。该研究揭示了盐生植物在非均匀盐分条件下的适应机制,为盐碱地的植物生态恢复和农业应用提供了新的理论支持。
这项研究通过对非均匀盐分分布条件下盐生植物Suaeda salsa的系统研究,不仅加深了我们对盐生植物应对盐胁迫机制的理解,而且为盐碱地农业和生态恢复提供了宝贵的理论依据。这一发现具有重要的应用前景,尤其是在改善盐碱地作物的生长条件和提升植物盐耐性方面。