该研究的主要作者包括Shanli Guo、Haibo Yin、Xia Zhang、Fengyun Zhao、Pinghua Li、Shihua Chen、Yanxiu Zhao和Hui Zhang，他们分别来自山东师范大学、聊城大学和山东理工大学生命科学学院。该研究于2006年发表在《Plant Molecular Biology》期刊上。
该研究的学术背景主要涉及植物分子生物学领域，特别是植物在盐胁迫和干旱胁迫下的耐受机制。随着全球盐碱地和干旱地区的增加，盐胁迫和干旱胁迫对农作物生产造成了严重的影响。盐胁迫不仅导致植物水分亏缺，还会对关键的生化过程产生负面影响。为了应对这些胁迫，植物特别是盐生植物（halophytes）进化出了将钠离子（Na+）隔离在液泡中的机制，以减少其对细胞代谢的毒性。液泡膜上的质子泵（proton pumps）在提供钠离子运输的驱动力中起着关键作用。该研究旨在从盐生植物碱蓬（Suaeda salsa）中克隆液泡膜质子转运无机焦磷酸酶（H+-PPase）基因，并研究其在提高拟南芥（Arabidopsis）盐和干旱耐受性中的作用。
研究的工作流程包括以下几个主要步骤：
植物材料的准备：从中国黄海沿岸的盐滩收集碱蓬种子，并在温室中培养。六周大的植物通过添加400 mM NaCl进行盐胁迫处理。同时，培养野生型拟南芥和转基因拟南芥，并在四周大时进行200 mM NaCl和9天水分亏缺的干旱胁迫处理。
SSVP基因的克隆：通过随机测序从NaCl处理的碱蓬cDNA文库中获得了部分H+-PPase基因的克隆。通过5’-RACE cDNA合成获得了完整的基因序列，并通过PCR验证了开放阅读框（ORF）。
Southern和Northern印迹分析：从碱蓬叶片中提取基因组DNA和总RNA，通过Southern印迹分析估计基因的拷贝数，并通过Northern印迹分析检测SSVP基因在盐胁迫下的表达情况。
质粒构建和植物转化：将SSVP ORF克隆到含有35S启动子的PR101质粒中，并通过农杆菌介导的转化方法将质粒导入拟南芥中。通过筛选获得转基因植株，并进行分子和生理学分析。
蛋白质测定和膜囊泡分离：通过Bradford法测定蛋白质含量，并通过Wang等人的方法分离液泡膜囊泡，测定V-ATPase和V-PPase的活性。
NaCl胁迫处理和Na+、K+含量测定：对四周大的拟南芥幼苗进行盐胁迫处理，并通过原子吸收分光光度计测定Na+和K+含量。
相对含水量测定：通过测定叶片鲜重、再水合重量和干重，计算相对含水量（RWC）。
研究的主要结果包括：
SSVP基因的克隆和特征分析：从碱蓬中克隆了SSVP基因，其cDNA包含2292 bp的开放阅读框，编码764个氨基酸。Southern印迹分析表明该基因是多拷贝的。SSVP基因与其他植物H+-PPase基因具有高度同源性，并包含催化基序DX7KXE。
SSVP基因的表达和酶活性：Northern印迹分析显示，SSVP基因在400 mM NaCl处理下被上调。转基因拟南芥中V-ATPase和V-PPase的活性在200 mM NaCl和干旱胁迫下显著高于野生型。
转基因拟南芥的盐和干旱耐受性：过表达SSVP的转基因拟南芥在200 mM NaCl处理下表现出更高的盐耐受性，并且在干旱胁迫下表现出更高的存活率和相对含水量。
该研究的结论是，SSVP基因的过表达可以显著提高拟南芥的盐和干旱耐受性。这一发现为通过遗传操作提高作物的耐盐性和耐旱性提供了重要的途径。
该研究的亮点包括：首次从碱蓬中克隆了SSVP基因，并证明了其在提高拟南芥盐和干旱耐受性中的作用。研究还发现，SSVP基因的过表达可以显著提高V-ATPase和V-PPase的活性，从而增强液泡对钠离子的隔离能力。
该研究的意义在于，通过遗传操作提高液泡质子泵的活性，可以显著提高作物的耐盐性和耐旱性，这对于在盐碱地和干旱地区提高农作物产量具有重要的应用价值。此外，该研究还为理解植物在盐胁迫和干旱胁迫下的耐受机制提供了新的见解。