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Sinomonas gamaensis Neau-HV1通过重塑IAA14-ARF7/19相互作用促进植物生长

期刊:New PhytologistDOI:10.1111/nph.20370

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Sinomonas gamaensis Neau-HV1通过重塑IAA14-ARF7/19相互作用促进植物生长

作者及研究机构
该研究由Yansong Fu、Juexuan Wang、Ziwei Su等多名学者共同完成,主要研究机构包括南京农业大学中国有机肥重点实验室、东北农业大学植物保护学院等。该研究于2025年发表在《New Phytologist》期刊上,DOI为10.1111/nph.20370。

学术背景
植物生长促进细菌(Plant Growth-Promoting Bacteria, PGPBs)在提高作物产量、增强土壤肥力、抑制病原菌生长以及缓解生物和非生物胁迫方面具有重要作用。然而,关于PGPBs促进植物生长的具体机制仍有许多未解之处。Sinomonas属细菌通常存在于土壤或根际环境中,其富集与植物生物量的增加呈正相关,但其促进植物生长的机制尚不明确。本研究旨在揭示Sinomonas gamaensis Neau-HV1(以下简称Neau-HV1)通过何种机制促进植物生长,特别是侧根(Lateral Root, LR)发育的分子机制。

研究流程
1. 植物生长促进效果的评估
- 研究对象:包括莴苣、小麦、玉米、花生和拟南芥等多种植物。
- 实验设计:通过土壤系统研究Neau-HV1对植物生长的影响,结合表型分析和显微观察,评估Neau-HV1对根发育的影响。
- 实验方法:使用Neau-HV1处理植物种子或幼苗,测量植株高度、茎粗、鲜重、干重等指标,评估其生长促进效果。

  1. Neau-HV1的植物生长促进特性分析

    • 实验内容:评估Neau-HV1的磷酸盐溶解能力、1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)脱氨酶活性以及吲哚-3-乙酸(IAA)的产量。
    • 实验方法:使用Pikovskaya琼脂培养基评估磷酸盐溶解能力,使用DF盐培养基评估ACC脱氨酶活性,通过高效液相色谱法(HPLC)测定IAA产量。
  2. 根际和根内定殖能力分析

    • 实验内容:评估Neau-HV1在根际和根内组织中的定殖能力。
    • 实验方法:通过高通量测序技术和内标法,定量分析Neau-HV1在不同时间点的定殖动态。
  3. Neau-HV1代谢物对侧根发育的影响

    • 实验内容:研究Neau-HV1分泌的代谢物对侧根发育的影响。
    • 实验方法:使用Neau-HV1发酵液处理拟南芥、水稻和玉米幼苗,观察侧根数量和主根长度的变化,并通过pCYCB1:GUS报告基因分析侧根原基(LRP)的发育阶段。
  4. Neau-HV1代谢物对生长素信号和运输的影响

    • 实验内容:研究Neau-HV1代谢物如何通过影响生长素信号和运输促进侧根发育。
    • 实验方法:使用pDR5:GUS和pDR5:Venus报告基因分析生长素响应,通过qPCR检测生长素运输相关基因(如PIN1、PIN2、PIN3、PIN7)的表达变化。
  5. IAA14与ARF7/19相互作用的调控机制

    • 实验内容:研究Neau-HV1代谢物如何通过调控IAA14与ARF7/19的相互作用促进侧根发育。
    • 实验方法:通过酵母双杂交(Y2H)实验、双分子荧光互补(BiFC)实验以及微尺度热泳(MST)实验,分析Neau-HV1代谢物对IAA14与ARF7/19结合亲和力的影响。

主要结果
1. Neau-HV1显著促进多种植物的生长
- Neau-HV1处理显著增加了莴苣、小麦、玉米、花生和拟南芥的植株高度、茎粗、鲜重和干重。例如,在莴苣实验中,Neau-HV1处理的植株鲜重比对照组增加了126.8%。

  1. Neau-HV1具有多种植物生长促进特性

    • Neau-HV1表现出较强的磷酸盐溶解能力(PSI=4.1),能够产生ACC脱氨酶,并在无外源L-色氨酸的情况下产生高达22.14 µg/mL的IAA。
  2. Neau-HV1在根际和根内具有强大的定殖能力

    • Neau-HV1在根际的定殖量在5天内迅速增加,随后趋于稳定;在根内组织的定殖量在20天内稳步增加,最终达到1.9×10³拷贝/g鲜重。
  3. Neau-HV1代谢物促进侧根发育

    • Neau-HV1发酵液显著增加了拟南芥、水稻和玉米的侧根数量,且不抑制主根伸长。pCYCB1:GUS报告基因分析显示,Neau-HV1代谢物显著增加了侧根原基的数量,特别是在第I阶段和第V-VII阶段。
  4. Neau-HV1代谢物通过生长素信号和运输促进侧根发育

    • Neau-HV1代谢物增加了pDR5:GUS和pDR5:Venus报告基因的表达,表明其能够激活生长素响应基因的表达。同时,Neau-HV1代谢物下调了PIN1、PIN2、PIN3和PIN7等生长素运输基因的表达。
  5. Neau-HV1代谢物通过调控IAA14与ARF7/19的相互作用促进侧根发育

    • Y2H、BiFC和MST实验表明,Neau-HV1代谢物能够调控IAA14与ARF7/19的结合亲和力,从而促进侧根发育。

结论
本研究发现,Sinomonas gamaensis Neau-HV1通过分泌代谢物,重塑IAA14与ARF7/19的相互作用,独立于生长素受体TIR1/AFB2,直接促进植物侧根发育。这一发现为植物-微生物相互作用提供了新的见解,并为开发基于Neau-HV1的生物肥料提供了理论依据。

研究亮点
1. 重要发现:首次揭示了Neau-HV1通过调控IAA14与ARF7/19的相互作用促进植物侧根发育的分子机制。
2. 方法创新:结合Y2H、BiFC和MST等多种技术,系统研究了Neau-HV1代谢物对蛋白质相互作用的影响。
3. 应用价值:Neau-HV1在促进作物生长和提高产量方面具有显著潜力,特别是在提高花生脂肪酸含量方面表现出独特的应用前景。


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