作者 Ruben Darío Motrich, Evelyne Van Etten, Femke Baeke, Clelia Maria Riera, Chantal Mathieu 和 Virginia Elena Rivero 来自阿根廷科尔多瓦国立大学（Universidad Nacional de Córdoba）的Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología以及比利时鲁汶大学（Katholieke Universiteit Leuven）的Laboratory of Experimental Medicine and Endocrinology。本研究发表于《The Journal of Urology》2010年3月，题目为“Crucial Role of Interferon-γ in Experimental Autoimmune Prostatitis”。

学术背景

研究领域为自身免疫性疾病与炎症性疾病，特别是针对慢性前列腺炎（Chronic Prostatitis, CP）和慢性盆腔痛综合征（Chronic Pelvic Pain Syndrome, CPPS）。CP/CPPS是一种高度流行且病因复杂的疾病，多发于青年和中年男性，临床特征包括慢性炎症、盆腔疼痛、排尿障碍以及性功能紊乱。由于部分患者未检测到明确的感染因子，自身免疫机制被推测可能在病理过程中发挥重要作用。已有研究显示患者体内产生对前列腺抗原的特异性淋巴细胞反应，以及炎症相关因子如IFN-γ（干扰素-γ，Interferon-γ）的水平显著升高。然而对该投射性动物模型（EAP，Experimental Autoimmune Prostatitis）中IFN-γ以及关键信号因子的作用尚不明确。

研究目标

本研究旨在明确IFN-γ及其信号通路关键转录因子IRF-1（IFN Regulatory Factor-1）和STAT-1（Signal Transducer and Activator of Transcription-1）在实验性自身免疫性前列腺炎（EAP）中的作用机制，以促进对CP/CPPS发病机制的理解及治疗方案的优化。

研究流程与方法

1. 动物模型与实验设计

研究采用NOD（非肥胖型糖尿病）小鼠、C57BL/6小鼠作为EAP的敏感模型。此外，选择缺乏IFN-γ信号调控因子的两种敲除小鼠模型（IRF-1 KO和STAT-1 KO）与C57BL/6小鼠对照组作对比，以研究IFN-γ信号通路在EAP发病中的作用机制。实验对象为8-10周龄小鼠，全部通过规范的屏障或病原防控饲养环境繁殖并配对。

2. 动物免疫处理

动物对照组使用完全福氏佐剂（CFA，Complete Freund’s Adjuvant），EAP模型组以精制的前列腺抗原（PSBP，Prostate Steroid Binding Protein, 30μg）与CFA混合后接种，注射部位包括足底、尾基和肩部，分别间隔15天强化免疫两次。免疫后7日或21日采集小鼠前列腺组织、淋巴结和血样进行进一步研究。

3. 组织学与免疫组化

实验通过前列腺切片组织学分析炎症程度，并以H&E染色评估病理学变化，同时通过抗CD45RB单抗荧光标记评估炎症细胞浸润模式。组织学评分标准为0至3分，分别表示无炎症、局部腺体萎缩、淋巴单核细胞浸润程度等不同病变等级。

4. 细胞免疫反应测定

收集局部淋巴结及脾脏单核细胞，分别培养于添加PSBP抗原的培养体系，观察细胞增殖水平（以3H-胸苷摄取为指标）及IFN-γ和IL-4（白介素-4）因子的分泌情况（采用ELISA法），评估特定体液与细胞介导免疫反应。

5. 前列腺细胞因子表达检测

采用定量实时PCR（qPCR）分析免疫及对照小鼠前列腺组织中多种细胞因子的mRNA表达，包括IFN-γ、IL-12、IL-10和IL-4等。

主要研究结果

1. EAP小鼠模型表现显著的自身免疫响应
   免疫后EAP模型组小鼠脾脏及淋巴结细胞表现出对PSBP的显著增殖反应，并伴随高水平IFN-γ分泌，同时观察到血清中针对PSBP的IgG2a抗体水平显著高于IgG1抗体，提示免疫偏向于Th1型模式。

2. 病灶组织的细胞因子环境显著变化
   前列腺组织分析发现，EAP小鼠模型在疾病后期（21日）表现为IFN-γ和IL-12显著升高，而IL-10水平下降，IL-4无明显变化，与Th1型免疫反应一致。此外，非免疫对照组或免疫干扰因子缺失组（IRF-1 KO和STAT-1 KO）中则未观察到明显炎症病理变化。

3. IFN-γ信号通路关键因子的缺失显著降低EAP发病风险
   在IFN-γ信号通路因子IRF-1和STAT-1敲除组小鼠中，与对照C57BL/6小鼠相比，组织切片显示未见淋巴细胞浸润和腺体病理性萎缩，同时IFN-γ、IL-12和IL-10表达显著降低，而IL-4有所上调。

4. 其他辅助实验结果
   尽管检测到某些细胞因子在实验小鼠中的相对变化，但IL-17在前列腺组织中的表达未被观察到，暗示Th17途径可能非EAP主要病理机制。

研究结论与意义

该研究首次系统性证明了IFN-γ及其调控因子IRF-1和STAT-1在EAP模型乃至人类CP/CPPS病理进程中的关键作用。特别指出，IFN-γ通过STAT-1信号通路激活下游效应基因，从而介导Th1型前炎症反应。而IRF-1调控多个IFN-γ刺激基因，通过与STAT-1协同作用扩大免疫应答。本研究揭示了IFN-γ信号通路失调可能是自身免疫性前列腺炎的核心机制。这不仅为CP/CPPS提供了新的病因假说，也提出了针对IFN-γ信号的潜在治疗策略。

研究亮点

1. 创新性动物建模：基于高度易感的NOD小鼠开发的EAP模型首次系统地研究了IFN-γ在自身免疫性炎症中的动态作用。
2. 机制性深化研究：通过敲除关键信号因子IRF-1与STAT-1，验证了IFN-γ在EAP中的中心地位。
3. 潜在应用价值：明确提出通过调控IFN-γ信号干预慢性自身免疫性前列腺炎的可能性。

研究展望

未来的研究可聚焦于IFN-γ信号通路的更加精细的分子机制解析，并在临床患者中进行针对性验证。此外，还需探讨其他新兴T细胞亚群（例如Th17）在不同模型或人类疾病中的具体作用。