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可调节硫酸化藻酸盐基水凝胶平台增强抗炎和抗氧化能力促进烧伤修复

期刊:Journal of NanobiotechnologyDOI:10.1186/s12951-023-02144-2

这篇文档属于类型a,即报告了一项原创研究。以下是针对该研究的学术报告:

主要作者及研究机构
本研究的主要作者包括Can Huang、Lanlan Dong、Baohua Zhao等,研究团队来自多个机构,包括西南医院烧伤研究所、中国人民解放军联勤保障部队第910医院烧伤整形外科、苏州大学医学院骨科研究所等。该研究于2023年发表在《Journal of Nanobiotechnology》期刊上。

学术背景
本研究的主要科学领域是组织工程和烧伤治疗,特别是针对深二度烧伤伤口的修复。深二度烧伤在愈合初期常伴随“炎症风暴”,即过度的炎症反应,导致正常愈合过程受阻,甚至引发组织退化。目前,临床常用的保守治疗方法(如感染控制和敷料覆盖)效果有限,手术干预则带来额外的痛苦和经济负担。因此,开发一种能够调节伤口炎症微环境的新型治疗方法具有重要意义。
本研究旨在设计一种基于硫酸化海藻酸盐(sulfated alginates, Algs)和普鲁士蓝(Prussian blue, PB)纳米酶的多功能抗炎水凝胶平台,通过靶向炎症趋化因子、M1型巨噬细胞和活性氧(reactive oxygen species, ROS),调节烧伤伤口的炎症反应,促进伤口愈合。

研究流程
研究包括以下几个主要步骤:

  1. 硫酸化海藻酸盐(Algs)的合成与表征

    • 通过调节氯磺酸(HClSO₃)浓度,合成了不同硫酸化程度的Algs(Algs-L和Algs-H)。
    • 使用傅里叶变换红外光谱(FTIR)和电感耦合等离子体发射光谱(ICP-OES)对Algs的硫酸化程度进行表征。
  2. 普鲁士蓝纳米酶(PBNPs)的制备与表征

    • 通过水热法制备PBNPs,并使用透射电子显微镜(TEM)、动态光散射(DLS)和紫外-可见光谱(UV-Vis)对其形貌、尺寸和分散性进行表征。
  3. 水凝胶的制备与表征

    • 将Algs与氯化钙(CaCl₂)交联,制备了Algs水凝胶。将PBNPs加入Algs-H水凝胶中,形成PB@Algs-H复合水凝胶。
    • 使用流变仪、扫描电子显微镜(SEM)和溶胀实验对水凝胶的力学性能、微观结构和溶胀行为进行表征。
  4. 水凝胶的生物相容性评估

    • 通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、活/死细胞染色和溶血实验,评估水凝胶对HUVECs、NIH 3T3和RAW264.7细胞的生物相容性。
  5. 水凝胶的抗炎和抗氧化性能研究

    • 通过ELISA和免疫荧光实验,评估水凝胶对炎症趋化因子(如IL-8和MCP-1)的吸附能力。
    • 通过电子顺磁共振(EPR)和荧光探针实验,评估PBNPs对ROS(如H₂O₂、OH·和O₂·⁻)的清除能力。
    • 通过流式细胞术和免疫荧光实验,研究水凝胶对巨噬细胞极化(从M1型向M2型转化)的调控作用。
  6. 动物实验验证

    • 建立小鼠深二度烧伤模型,分别用生理盐水、Alg、Algs-L、Algs-H和PB@Algs-H水凝胶处理伤口。
    • 在治疗后第1、7、14和21天,观察伤口愈合情况,并通过免疫荧光、ELISA和RNA测序等技术,分析伤口组织的炎症因子、ROS水平和基因表达变化。

主要结果
1. Algs和PBNPs的表征
- Algs的硫酸化程度与其对炎症趋化因子的吸附能力呈正相关,Algs-H表现出最高的吸附效率。
- PBNPs具有优异的抗氧化性能,能够模拟过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,有效清除ROS。

  1. 水凝胶的性能

    • PB@Algs-H水凝胶具有良好的生物相容性和缓释性能,能够在72小时内持续释放PBNPs。
    • Algs水凝胶能够显著吸附IL-8和MCP-1,减少炎症细胞在伤口中的浸润。
    • PB@Algs-H水凝胶能够有效清除ROS,缓解氧化应激。
  2. 动物实验结果

    • PB@Algs-H水凝胶显著加速了小鼠深二度烧伤伤口的愈合,促进了新生血管的形成和胶原沉积。
    • RNA测序结果显示,PB@Algs-H水凝胶显著下调了与炎症和氧化应激相关的基因表达,同时上调了与组织再生相关的基因表达。

结论
本研究开发了一种基于硫酸化海藻酸盐和普鲁士蓝纳米酶的多功能抗炎水凝胶平台,通过靶向炎症趋化因子、M1型巨噬细胞和ROS,有效调节了深二度烧伤伤口的炎症微环境,促进了伤口的快速愈合。该研究为烧伤治疗提供了一种新的治疗策略,具有重要的临床应用价值。

研究亮点
1. 通过硫酸化海藻酸盐和普鲁士蓝纳米酶的结合,实现了对伤口炎症的多维度调控。
2. PB@Algs-H水凝胶具有优异的生物相容性和缓释性能,能够持续发挥抗炎和抗氧化作用。
3. 动物实验和RNA测序结果验证了该水凝胶在促进伤口愈合方面的显著效果。

其他有价值的内容
本研究还探讨了硫酸化海藻酸盐对巨噬细胞极化的调控机制,为进一步研究免疫调节材料提供了新的思路。此外,该水凝胶平台的制备方法简单,易于大规模生产,具有较高的商业化潜力。

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