La salive des personnes atteintes d'hémophilie A déclenche la coagulation via les complexes de ténase extrinsèque

Médecine Hématologie
Hémophilie A Complexe de ténase extrinsèque Salive Coagulation Déficience en FVII

Complexe Ténase Extrinsèque Dans La Salive : Un Facteur Clé Pour La Coagulation Chez Les Patients Atteints D’Hémophilie A

Contexte

L’hémophilie A est une maladie héréditaire récessive liée à l’X, causée par une déficience ou une anomalie du facteur VIII (FVIII). Les patients atteints d’hémophilie A sévère souffrent souvent de saignements spontanés, notamment des hémarthroses (saignements articulaires répétés) qui représentent 90 % des épisodes hémorragiques chez ces patients. Cependant, les saignements des muqueuses, tels que les saignements oropharyngés, sont rares dans cette population. En revanche, des saignements oropharyngés fréquents sont observés chez les patients atteints de carence sévère en facteur VII (FVII).

Des travaux récents ont révélé que certains fluides corporels, tels que le liquide amniotique, le lait maternel et la salive, contiennent des vésicules extracellulaires (VES) qui exposent des complexes ténase extrinsèques fonctionnels (facteur tissulaire [TF] et facteur VIIa activé [FVIIa]), capables de déclencher la coagulation. Sur la base de ces découvertes, cette étude cherche à déterminer si ces complexes dans la salive peuvent expliquer la relative rareté des saignements oropharyngés chez les patients atteints d’hémophilie A, et leur prévalence chez ceux souffrant de carence en FVII.

Informations sur l’Étude et les Auteurs

Cette étude a été dirigée par Johannes Thaler et son équipe, en collaboration avec des institutions de renom, notamment l’Université médicale de Vienne (Autriche), l’Université d’Amsterdam (Pays-Bas) et l’Université Johannes Gutenberg de Mayence (Allemagne). Les travaux ont été publiés dans le journal Blood, en décembre 2024, et ont bénéficié de financements de la Fondation allemande pour la recherche, ainsi que du Fonds scientifique médical de la Ville de Vienne.

Méthodes et Protocole de Recherche

Design de l’Étude

Les chercheurs ont recueilli des échantillons de salive et de sang provenant de deux groupes de patients : 1. Patients atteints d’hémophilie A sévère : cinq hommes adultes (activité du FVIII < 1 IU/dL). 2. Patients présentant une carence sévère en FVII : trois hommes adultes (activité du FVII < 1 IU/dL).

Les échantillons ont été collectés avant et après l’administration de thérapies de remplacement du FVIII ou du FVII, permettant ainsi une comparaison des résultats avant et après traitement. Les analyses principales incluaient :

  1. Traitement des Échantillons :

    • La salive a été centrifugée pour éliminer les cellules et leurs débris, permettant l’obtention d’une salive acellulaire.
    • Les VES ont été isolées via ultracentrifugation et chromatographie d’exclusion par taille (SEC).

  2. Analyses Fonctionnelles :

    • Tests de coagulation sanguine : La salive a été ajoutée à du sang total ou du plasma déficient en FVIII pour mesurer le temps de coagulation grâce à la thromboélastographie.
    • Génération de thrombine : On a mesuré la capacité de la salive à induire une production de thrombine.
    • Génération de FXa : Un test chromogénique, mesurant l’activité du facteur Xa, a été utilisé.

  3. Caractérisation des VES :

    • La morphologie des VES a été observée par microscopie électronique à transmission (TEM).
    • Les marqueurs des VES (CD63 et CD9) ont été évalués par cytométrie en flux et Western Blot.
    • Des expériences d’inhibition avec des anticorps ont été réalisées pour identifier le rôle des complexes TF/FVIIa.

  4. Évaluation des Modèles Hémorragiques :

    • Une enquête rétrospective a été réalisée sur 6 patients atteints d’hémophilie A sévère ne recevant pas de prophylaxie régulière du FVIII, afin de documenter leurs schémas de saignements au cours des 12 derniers mois.

Analyse Statistique

Les analyses statistiques ont été réalisées en utilisant le logiciel GraphPad Prism. Les variables continues sont exprimées sous forme de moyennes ± écart-type, et une valeur de p < 0,05 a été considérée comme significative.

Résultats Clés

La Salive des Patients Hémophiles Favorise la Coagulation Indépendante du FVIII

  1. Effet de la Salive sur le Sang Total et le Plasma :

    • L’ajout de salive à du sang total déficient en FVIII réduit de manière significative le temps de coagulation (1125 ± 139 secondes à 270 ± 37 secondes, p = 0,0006).
    • Le plasma déficient en FVIII coagulait également en présence de salive.

  2. Présence de Complexes Ténase Extrinsèques :

    • Les VES dans la salive provenaient principalement de granulocytes (CD66b) et contenaient des complexes fonctionnels TF/FVIIa. Cette activité coagulante a été bloquée lors de l’utilisation d’anticorps ciblant les complexes TF/FVIIa.
    • La dissociation des complexes TF/FVIIa a été observée en présence d’agents chélatants du calcium, indiquant que le calcium dans la salive aide à stabiliser ces complexes.

  3. Profil Hémorragique des Patients Hémophiles :

    • Sur 105 épisodes hémorragiques, 19 (18 %) étaient des saignements oropharyngés qui ont cessé spontanément sans besoin de FVIII. En revanche, les hémorragies articulaires (66 %) et musculaires (14 %) nécessitaient un traitement par FVIII.

Chez les Patients Déficients en FVII

La salive des patients atteints de carence sévère en FVII ne contenait pas de complexes ténase extrinsèques fonctionnels. Cependant, une addition de FVIIa recombiné restaurait la génération de FXa, prouvant l’absence endogène de FVII dans leur salive comme explication des saignements fréquents des muqueuses.

Conclusions et Implications

Valeur Scientifique et Médicale

  1. Portable Scientific Discovery :

    • Les complexes ténase extrinsèques dans la salive expliquent en partie pourquoi les saignements des muqueuses sont rares chez les patients atteints d’hémophilie A sévère par opposition à ceux souffrant de carence en FVII.

  2. Perspectives Cliniques :

    • Une meilleure sensibilisation sur la capacité intrinsèque de leur corps à compenser certains déficits de coagulation pourrait apporter aux patients un sentiment d’autonomisation.
    • Le rôle de la salive dans d’autres scénarios pathologiques ou chirurgicaux pourrait également être exploré, surtout dans le cadre de soins dentaires.

Points Forts de l’Étude

  • L’étude représente la première exploration des mécanismes de compensation de la coagulation via des vésicules salivaires chez les patients atteints d’hémophilie A.
  • Les méthodologies innovantes employées, telles que la mesure de l’activité FXa par des tests chromogéniques, renforcent la robustesse du travail scientifique.

Cette recherche pave la voie à une meilleure compréhension des hémorragies et des mécanismes biologiques induisant des différences de phénotypes saignants chez diverses conditions de déficit en facteurs de coagulation.