抑制性FCγ受体缺失增强CD8 T细胞干性，提高抗PD-1疗法对胶质母细胞瘤的响应

2024-11-22 Fri
抑制性Fcγ受体的删除增强CD8 T细胞干性，增加抗PD-1疗法对胶质母细胞瘤的响应性背景与研究目的胶质母细胞瘤（Glioblastoma, GBM）是一种侵袭性强、预后差的中枢神经系统肿瘤，其患者的中位生存期仅为14.6个月。尽管免疫检查点阻断疗法（Immune Checkpoint Blockade, ICB）在其他癌症中取得显著成效，但在GBM治疗中的效果却十分有限。造成这种疗效差的主要原因是GBM特有的肿瘤微环境（Tumor Microenvironment, TME），其受血脑屏障的保护，导致抗原呈递能力减弱并使细胞毒性T淋巴细胞（Cytotoxic T Lymphocyte, CTL）难以充分发挥作用。即使T细胞成功浸润肿瘤，往往也会因多种免疫抑制因素而发生“衰竭”。
近年来的研究揭示了衰竭T细胞中存在前体衰竭T细胞（Progenitor-Exhausted T Cells, Tpex），具有干性特征的T细胞可能在提高ICB疗效中发挥重要作用。在这种背景下，本研究聚焦于CD8 T细胞中特定的抑制性受体FcγRIIB，通过删除该受体来增强CD8 T细胞的干性，以改善GBM的抗PD-1疗法效果。研究目的在于探究FcγRIIB删除是否能够增强小鼠GBM模型中CD8 T细胞的抗肿瘤反应，从而提高抗PD-1疗法的响应性和疗效。
研究方法本研究使用了FcγRIIB缺失（FcγRIIB−/−）小鼠和小鼠GL261胶质瘤模型，主要流程包括以下几个步骤：
模型构建与抗PD-1治疗：在小鼠大脑内注射GL261胶质瘤细胞构建GBM模型，随后对部分小鼠进行抗PD-1单一疗法或联合FcγRIIB删除的抗PD-1治疗，观察其生存情况及临床症状。
免疫细胞的分析：使用流式细胞术和单细胞RNA测序（Single-Cell RNA Sequencing, scRNA-seq）对肿瘤浸润的CD8 T细胞进行亚群分析，着重观察在FcγRIIB−/−小鼠中是否出现干性较高的T细胞亚群。
效应细胞的功能测试：通过免疫细胞因子的表达水平、细胞增殖标志物的检测以及体外杀伤实验，评估抗PD-1治疗后CD8 T细胞的效应能力和增殖特性，验证FcγRIIB缺失对增强抗肿瘤反应的作用。
转移实验和淋巴结细胞源分析：采用特定抗原的OT-I细胞转移实验，探讨源自肿瘤引流淋巴结（Tumor-Draining Lymph Node, TDLN）中的肿瘤特异性记忆T细胞在增强抗PD-1治疗响应中的关键作用。
主要研究结果FcγRIIB缺失增强抗PD-1治疗的生存效果：研究发现，抗PD-1单一疗法对小鼠GBM模型的效果有限，但与FcγRIIB删除组合使用显著提高了小鼠的长期生存率，延长了中位生存期。此外，部分长期存活的小鼠在再次接种同种肿瘤细胞后未表现出复发，表明在抗PD-1疗法下FcγRIIB−/−小鼠产生了持久的肿瘤特异性记忆。
肿瘤特异性记忆T细胞的干性特征：分析显示，FcγRIIB−/−小鼠中的肿瘤浸润性CD8 T细胞（特别是肿瘤特异性记忆T细胞，TTSM）表现出较高的干性特征（如TCF1表达），而且主要驻留于TDLN中，从而提供了一个稳定的抗原源并避免了TME的免疫抑制效应。
FcγRIIB删除对CD8 T细胞功能的提升：流式细胞术和单细胞测序分析表明，FcγRIIB−/−小鼠中的CD8 T细胞相比于野生型小鼠，展示出更高的效应细胞功能，包括细胞因子如IFN-γ、TNF-α的表达水平显著增加。此外，这些CD8 T细胞具有较强的增殖活性，提示FcγRIIB缺失可能通过增强CD8 T细胞的增殖与效应功能来提高其抗肿瘤反应。
淋巴结中的TTSM对抗PD-1治疗的响应性：在体内使用S1P1抑制剂阻断CD8 T细胞从TDLN向肿瘤转移后，FcγRIIB−/−小鼠的抗PD-1疗法效果显著下降，表明TTSM在TDLN中的维持和释放对于增强抗PD-1治疗的响应至关重要。
在GBM患者外周血中检测到的FcγRIIB表达：此外，在GBM患者的外周血单核细胞中也检测到FcγRIIB的高表达，表明该受体可能与CD8 T细胞的衰竭特征相关，进一步支持FcγRIIB在GBM中作为潜在治疗靶点的可能性。
研究意义与应用价值本研究通过对FcγRIIB的抑制或删除揭示了增强CD8 T细胞抗肿瘤响应的潜力，为ICB在GBM等免疫抑制型肿瘤中的应用提供了新的思路。研究结果表明，FcγRIIB作为一个重要的调节受体，能够通过限制CD8 T细胞的干性来影响其功能。因此，删除FcγRIIB可能有助于激活和维持肿瘤特异性T细胞，从而增强抗PD-1治疗的效果。特别是针对GBM这种传统上ICB耐药的肿瘤类型，FcγRIIB删除联合抗PD-1疗法的使用前景值得进一步深入探讨。
在临床应用上，本研究为GBM患者的个性化免疫治疗提供了新方向。通过靶向FcγRIIB，ICB疗法可能获得更持久和更强的抗肿瘤效果。同时，针对淋巴结内肿瘤特异性记忆T细胞的保护和激活也为优化ICB疗法提供了新的理论依据。未来在肿瘤免疫治疗中，结合FcγRIIB的调控策略，或可应用于其他ICB耐药类型的癌症，提高患者的生存率和生活质量。