铁(Fe3+)依赖的端粒酶再激活驱动结直肠癌发展

本研究揭示的结直肠癌进展机制

铁(铁离子3+)依赖的端粒酶再激活驱动结直肠癌发展

一、研究背景

结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)是全球第三大常见癌症,而其发病原因涉及基因和非基因因素。然而,已有研究表明,铁含量过高和遗传性铁超载与CRC的发生有显著关联,但如何通过金属介导的信号通路导致致癌作用仍是个谜。红肉中包含的杂环胺、多环芳烃等已被认为是促癌物,但较少研究解答铁水平升高如何驱动CRC的发生。此外,铁在细胞必需的正常生理功能中扮演关键角色,但铁含量异常可能导致组织损伤和DNA损伤,从而促进癌细胞生长。因此,了解铁在CRC发病中的具体分子机制具有重要意义。

二、研究来源

该研究由来自新加坡科学技术研究局(A*STAR)下属的分子与细胞生物学研究所(Institute of Molecular and Cell Biology, IMCB)等多个机构的研究人员联合开展。主要作者包括Raghuvaran Shanmugam,Prativa Majee,Wei Shi等。研究发表于《Cancer Discovery》期刊,揭示了铁在结直肠癌发展中的关键作用。

三、研究工作流程

1. 研究程序的详细说明

研究首先从新鲜结直肠癌患者样本、患者源性移植物(PDX)及原代结直肠癌类器官和细胞系中,鉴定出在铁(铁离子3+)依赖下,端粒酶逆转录酶(hTERT)被重新激活是CRC发病的关键。随后,通过化学基因筛选,结合等温剂量响应指纹和质谱分析,研究人员找到了一种小分子SP2509,它通过与铁离子3+竞争结合特异性抑制Pirin介导的hTERT再激活。

具体流程包括几个主要步骤:

a. 端粒酶调控因子的筛选

研究人员构建了一个端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子控制的纳米萤光素酶报告系统。使用这一系统对多个小分子库进行高通量筛选,最终找到SP2509作为最强的hTERT转录抑制剂之一。

b. 实验验证及分子靶标确认

通过热致溶解实验和质谱分析,确认SP2509的分子靶标是Pirin,一种铁结合蛋白。随后通过补充实验,发现SP2509通过与铁竞争结合,抑制了Pirin的功能,导致hTERT表达量和端粒酶活性的减少。

c. 铁离子3+和hTERT活性的相关性研究

研究利用40个新鲜CRC患者样本,通过端粒酶重复扩增协议(TRAP)和普鲁士蓝染色法,发现肿瘤样本中铁离子3+水平和端粒酶活性显著相关,表明铁在hTERT转录中的关键作用。

d. Pirin对hTERT转录的正向调控作用

通过转基因和小分子抑制剂实验,验证了Pirin在铁离子3+依赖下对hTERT转录的调控作用。实验显示Pirin过表达可以恢复被SP2509抑制的端粒酶活性,而Knockdown或突变Pirin则显著减低hTERT表达和细胞增殖能力。

e. 进一步的体内研究

在Pirin高表达和低表达的患者源性移植瘤(PDX)模型中,发现补铁会显著促进肿瘤生长,而铁螯合剂(如DFO)和SP2509可以抑制Pirin高表达PDX快速生长,这些发现提供了进一步支持Pirin在铁依赖性hTERT转录激活中的关键作用。

2. 研究结果

研究发现了几个关键点:

  • Pirin是一个线性依赖于铁的转录因子,在铁离子3+存在下促进hTERT转录并驱动CRC发生。
  • SP2509作为小分子抑制剂,通过对Pirin结合位点的竞争作用,显著抑制端粒酶活性,从而抑制CRC细胞增殖。
  • hTERT转录的重新激活在Pirin高表达和铁离子3+高的CRC样本中尤为显著,表明以上因素在CRC发生和进展中的相互作用。

四、研究意义与价值

1. 科学价值

该研究首次揭示了铁在结直肠癌发展中的分子机制,提供了铁依赖的Pirin作为hTERT转录的关键调节因子,为理解铁与癌症之间的关系提供了新的视角。同时,明确了通过小分子SP2509抑制Pirin功能,成功降低了端粒酶活性和癌细胞的增殖能力,为癌症的治疗提供了新的靶点。

2. 应用价值

该研究结果对于开发新的癌症治疗药物有重要意义,小分子如SP2509有望成为新的治疗手段,特别是针对那些端粒酶活性高和铁离子3+高的CRC患者。此外,铁螯合剂的使用也可在一定程度上控制铁依赖性癌症的进展。

3. 亮点和创新点

本研究的几大亮点包括:

  • 首次揭示铁通过Pirin介导的hTERT再激活机制与结直肠癌的关系。
  • 发现小分子SP2509通过竞争铁的结合位点有效抑制Pirin功能,从而抑制端粒酶活性。
  • 提出了将铁螯合剂应用于高铁指数的CRC患者以抑制肿瘤生长的潜在治疗策略。

结论

通过深入解析铁在结直肠癌中的作用机制,本研究证明了铁依赖的Pirin在端粒酶再激活和癌症发展中的重要性,并展示了小分子SP2509作为潜在治疗剂的有效性和安全性。未来应进一步研究SP2509在其他癌症类型中的应用,并探索如何更好地结合其他治疗方法提高其临床效果。