体内布鲁顿酪氨酸激酶抑制通过调节CD84介导的粒细胞生成减轻酒精相关性肝病

2024-08-22 Thu
研究背景严重的酒精相关性肝炎（ALD）是酒精相关性肝病（AALD）的一种致命形式，ALD的病程通常伴随着肝脏中性粒细胞浸润，这一过程显著影响病情的严重程度。然而，酒精对中性粒细胞功能的具体影响仍然不甚明了。基于此，确定能够减轻中性粒细胞介导的肝脏损伤的治疗目标是极其重要的。布鲁顿酪氨酸激酶（BTK）在中性粒细胞的发育和功能中发挥关键作用，但其在ALD中的角色尚未被探明。
论文来源这篇论文由Prashanth Thevkar Nagesh、Yeonhee Cho、Yuan Zhuang、Mrigya Babuta等作者撰写，来自Beth Israel Deaconess Medical Center, Harvard Medical School, Boston, MA, USA。论文发表在《Science Translational Medicine》期刊，发布时间为2024年8月7日。
研究流程本研究采用了多种实验方法及技术，以明确BTK在ALD中的作用并评估BTK抑制剂（BTKIs）的治疗潜力。
a) 详细研究流程初步实验：通过RNA测序分析了患有ALD的患者和健康对照组的循环中性粒细胞BTK表达（P=0.05），发现ALD患者中BTK表达和磷酸化水平显著增加。
体外实验：在体外实验中，以生理相关剂量的酒精迅速诱导中性粒细胞中的TLR4介导的BTK磷酸化 （PBTK）。
动物模型实验：在预临床ALD模型中，采用小分子BTK抑制剂（Evobrutinib）或髓系细胞特异性BTK敲除，结果显示可减少促炎细胞因子和中性粒细胞介导的肝脏损伤。此外，PBTK还被发现是酒精诱导的骨髓粒细胞生成和肝脏中性粒细胞浸润的关键。
体内实验：在体内，通过BTK抑制或髓系细胞特异性BTK敲除减少了粒细胞生成、循环中性粒细胞、肝脏中性粒细胞浸润和肝脏损伤。
进一步验证：采用液相色谱-串联质谱技术（LC-MS/MS），识别了BTK的激酶靶标CD84，发现其涉及粒细胞生成。在体外实验中，CD84促进了酒精诱导的初级人中性粒细胞中的白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α），而使用CD84阻断抗体处理则抑制了这些炎症因子的产生。
b) 主要结果每道实验步骤均支持了BTK在ALD病理机制中的重要作用。详细分析显示：
循环与肝脏中浸润的中性粒细胞：在ALD患者和小鼠模型中，肝脏中性粒细胞浸润和骨髓粒细胞生成显著增加。
BTK与PBTK水平：患有ALD及其模型中，BTK和PBTK的水平均显著上调。
直接作用机制：急性酒精暴露直接诱导中性粒细胞中的BTK磷酸化，并通过TLR4通路实现这一过程。
BTKI的治疗效果：BTKI（Evobrutinib）显著减少了ALD小鼠模型中的中性粒细胞浸润、炎症及肝脏损伤，支持了BTKI的治疗潜力。
粒细胞生成的关键机制：BTK在骨髓粒细胞生成中的中心作用得到证实，通过抑制BTK磷酸化显著减缓了酒精诱导的粒细胞生成。
结论与意义通过这些实验，本文揭示了BTK在中性粒细胞介导的炎症及ALD相关肝损伤中的关键作用，该发现为潜在的治疗干预方案提供了新的方向。使用BTKI可能成为ALD治疗的有效策略，其抑制BTK磷酸化的机制能够减少中性粒细胞介导的炎症和肝损伤。
研究亮点创新性：本研究首次明确了BTK在ALD中的关键调控作用。
潜在的治疗应用：使用BTKI（Evobrutinib）有效减缓了肝损伤，提供了一种潜在的治疗策略。
深入的机制研究：通过识别BTK的激酶靶标CD84，揭示了其中性粒细胞生成的机制。
其他有价值信息本研究还提供了大量数据支持，包括人类和小鼠模型的多次重复实验，进一步验证了BTKI治疗ALD的有效性及其潜在的临床应用价值。同时，液相色谱-串联质谱技术的使用增加了研究的深度，可为后续研究提供更翔实的分子机制解析。
本研究不仅揭示了BTK在ALD中的作用机制，还为新型治疗策略的开发提供了理论依据，具有重要的科学与临床应用价值。